采用纯培养方法对玻利维亚进口商品盐样品的嗜盐微生物进行分离培养,通过 16S rRNA 基因的测序和序列相似性分析,确定所分离菌株的分类地位。在此基础上,对该样品中的嗜盐微生物群落组 成和物种多样性进行系统研究,并且选取部分代表菌株进行胞外酶活及拮抗作用测定。恒温培养箱、恒温震荡培养箱,上海一恒科学仪器有限公司; PCR 仪,北京东胜创新生物科技有限公司; 电泳仪,北京六一生物科技有限公司; 凝胶成像系统,上海天能公司; 台式高速离心机,湖南湘仪离心机仪器 有限公司; YXQ-75SII高压蒸汽灭菌锅,上海九州网址医疗生物仪器股份有限公司。
在不同 pH 条 件下从玻利维亚商品盐样品中分离得到的优势物种不 尽相同。在 pH 为 7. 5 和 8. 5 的培养基分离的嗜盐古菌 中,分别有 107 株、30 株来自 Halobacterium 属,分别占所 分离菌株的 56. 9%、58. 8%,说明 Halobacterium 属菌株玻利维亚商品盐可培养嗜盐古菌组成( 属级水平) Fig.3 Composition of cultivable halophilic archaea from commercial salt of Bolivia ( genus level) 注: 不同颜色代表不同属嗜盐古菌,色块高度代表该属占比。 为该 pH 生境中的优势物种 。在 pH 为 9. 5 的条件下共分离到 9 株嗜盐古菌,其中有 7 株来自 Natrialba 属,占比 77. 8%,说明 Natrialba 属菌株为 嗜盐嗜碱类群,也成为较高 pH 条件下的优势物种 。而在 pH 为 8. 0 和 9. 0 的培养基中,嗜盐 古菌种类分布较均匀,优势种的优势地位并不明 显: 在 pH8. 0 条件下 Halobacterium 属菌株最多,有 42 株,占比 21. 5%; 在 pH9. 0 条件下 Halopenitus 属 菌株最多,有 22 株,占比 35. 5% 。玻利维亚安第斯山脉附近分布有众多的高盐环境,其中卤水型矿床形成于封闭汇水盆地内,多以盐湖的 形式露出于地表。