由血栓引起的急性心肌梗死、脑卒中等心脑血 管疾病，严重危害着人类健康和生命。从海洋生物 体内寻找和开发抗凝血和抗血栓活性物具有广泛的 应用前景。随着人们对海洋多糖抗凝血、抗血栓、降血脂及其他药理活性研究的不断深入，多糖已成 为生物医药和化学领域共同关注的热点，硫酸多糖 因其具有强阴离子性，可表现出不同程度的抗凝血活性。

SPF 级 Wistar 大鼠，雄性，体质量 180～200 g， 购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证 号 SCXK（京）2012-0001。饲养于天津药物研究院 新药评价有限公司动物实验楼（屏障环境， AAALAC 认证）。温度 20～26 ℃，相对湿度 40%～ 70%，不少于 15 次/h 全新风，昼夜明暗交替时间为 12 h/12 h。

FV，产品批号 20120301，由深圳海王药业有 限公司提供，平均相对分子质量为 11 000～15 000； 低分子量肝素钙注射液（LMWHC），产品批号 12105049，规格 0.4 mL∶4 100 AxaIU，由葛兰素史 克提供。

G&G T2000 型电子天平由美国双杰兄弟（集 团）有限公司提供；PL203 型电子天平，由梅特勒 托利多仪器（上海）有限公司提供；SDZ-A1 型体 外血栓形成仪由无锡县电子仪器二厂提供； HPX-9052MBE 型电热恒温培养箱由上海九州网址实业有限公司医疗设备厂提供。

前期预试验对 FV 的剂量及作用时间做了探 索，最终将 FV 的剂量设定为 20、10、5、2.5、1.25、 0.63 mg/kg，LMWHC 的临床日使用量为 38 IU/kg， 人按 60 kg 计，大鼠按 200 g 计，按体表面积折算大 鼠的临床等效剂量为 213 IU/kg，依此对其设定剂量 进行本研究。 参考 Reyers 法将 Wistar 大鼠随机分为对照 组、FV 20、10、5、2.5 mg/kg 组和 LMWHC 213 IU/kg 组，每组 10 只，给药体积为 5 mL/kg。大鼠以 1% 戊巴比妥钠 5 mL/kg 腹腔注射麻醉后，尾静脉给予 相应受试品，对照组给予生理盐水。15 min 后大鼠 腹部碘伏消毒，沿腹正中切开大鼠腹壁，分离下腔 静脉，并于左肾静脉下方预置丝线结扎下腔静脉，关闭缝合腹腔，结扎 4 h 后重新打开腹腔，于结扎 线下方 2 cm 处夹闭血管，同时结扎静脉侧枝，纵行 剖开血管，观察有无血栓形成，若血栓形成，用滤 纸吸去残血称血栓湿质量后，放置于烘箱内烘干， 再称量血栓干质量。计算血栓抑制率（IR）。 IR＝（对照组血栓质量－给药组血栓质量）/对照组血 栓质量

参考 Chandler 体外血栓法将 Wistar 大鼠随机 分为对照组、FV 20、10、5、2.5 mg/kg 组和 LMWHC 213 IU/kg 组，每组 10 只，给药体积为 5 mL/kg。大 鼠以 1%戊巴比妥钠 5 mL/kg 腹腔注射麻醉后，尾静 脉给予相应受试品，对照组给予生理盐水，15 min 后沿腹正中切开大鼠腹壁，腹主动脉迅速采血 1 mL 注入硅化的塑料管中放入血栓形成仪中，于 37 ℃ 下 18 r/min 旋转 15 min 后自环内倾出血栓，用滤纸 吸干残血，称取血栓湿质量，血栓放置于烘箱内烘 干再称量血栓干质量。计算血栓抑制率（IR）。 IR＝（对照组血栓质量－给药组血栓质量）/对照组血 栓质量

依完全随机法将 Wistar 大鼠分为对照组、FV 20、10、5、2.5 mg/kg 组和 LMWHC 213 IU/kg 组， 每组 9 只，给药体积为 5 mL/kg。大鼠以 1%戊巴比 妥钠 5 mL/kg 腹腔注射麻醉后，尾静脉给予相应受 试品，对照组给予生理盐水。颈部碘伏消毒，仔细 分离右侧颈总动脉和左侧颈外静脉，颈外静脉先结 扎静脉远心端，于近心端剪开一小口，将事先准备 好聚乙烯管（管中放置一根预先称重的 4 号缝合线 约 6 cm，并将 50 U/mL 肝素溶液充满管腔）向近 心端插入并结扎固定。右侧颈总动脉先用血管夹夹 住近心端，剪开一个小口，将管向近心端插入并结 扎固定。给药 15 min 后放开血管夹计时 15 min， 之后将线取出称量湿质量、干质量。计算血栓抑制 率（IR）。 IR＝（对照组血栓质量－给药组血栓质量）/对照组血 栓质量

计量资料均以x±s 表示，应用 SPSS 20.0 统计 软件分析。先进行方差齐性检验，方差齐时以单因 素方差分析进行整体比较，两两比较采用 t 检验； 方差不齐采用非参数检验进行整体比较，两两比较 采用 Kruskal-Wallis 检验。

与对照组比较，FV 20、10、5、2.5 mg/kg 组均 能够明显降低大鼠下腔静脉的血栓湿质量和干质量 （P＜0.05、0.01），阳性药 LMWHC 组能够明显降低 大鼠下腔静脉的血栓干湿质量（P＜0.01）。FV 对血栓湿质量的抑制率最高可达 77.3%，对血栓干质量 的抑制率最高可达 74.9%。剂量相关性的线性拟合方 程分别为 Y＝−0.377X＋11.70（r＝0.978）、Y＝ −0.173X＋5.62（r＝0.901），剂量相关性较好，提示 FV 有明显的抑制静脉血栓形成的作用。与对照组比较，FV 20、10、5、2.5 mg/kg 组均 能够明显降低大鼠体外形成的血栓湿质量（P＜ 0.05、0.01），FV 20、10、5 mg/kg 组均能够明显降 低大鼠体外形成的血栓干质量（P＜0.05、0.01）。 阳性药 LMWHC 组能明显降低大鼠体外形成的血栓 干湿质量（P＜0.01）。FV 对血栓湿质量的抑制率最高可达 94.3%，对血栓干质量的抑制率最高可达 96.6%。剂量相关性的线性拟合方程分别为 Y＝ −0.002 X＋0.061（r＝0.997）、Y＝−0.000 1 X＋0.015 （r＝0.768），血栓湿质量的 r 值为 0.997，剂量相关 性明显，而血栓干重质量的 r 值为 0.768，剂量相关 性稍差，提示 FV 具有抑制体外血栓形成作用。

血栓性疾病是一类严重危害人类健康的疾病， 其发病率和死亡率都很高，目前国内外都在寻找组 成均一、活性专一，且相对分子质量小、抗凝血活 性低而抗血栓作用较强的新型类肝素药物，发现岩 藻多糖具有上述特点，其药理活性及机制已经多方 面的报道。FV 是从海带等褐藻中提取出来的岩 藻聚糖硫酸酯，经过化学降解、修饰而得到的阴离 子物质。本文对其抗血栓活性进行了研究。静脉血栓主要由于血流缓慢或瘀滞、凝血因子 聚集而导致血液凝固，所有凝血酶的激活是主要因 素之一。结扎大鼠下腔静脉使血流瘀滞，启动内源 性凝血系统，促进静脉血栓的形成。



 

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