上海博讯发现根据研究证明,植物内生真菌数量巨大,种类繁多,分布广泛,其次级代谢产物具有多种生物活性。本文上海博讯医疗生物仪器股份有限公司以紫薯和麻黄为材料,采用组织分离法,分离内生真菌,并根据菌落形态和显微形态进行形态学鉴定,为后续实验提供材料。
1 实验仪器
超净工作台,杭州净化设备厂;手提式高压灭菌锅,上海博讯医疗生物仪器股份有限公司;生化恒温培养箱,上海博讯生物仪器股份有限公司;电子分析天平,梅特勒仪器上海有限公司。
2 形态特征
结果显示:菌落的特征各不相同,菌落颜色有白色、黑色、紫色、粉色等多种颜色;菌落形态有绒毛状、链状、絮状等;有些菌落边缘整齐,有些爬壁;有些产色素,基质颜色也会变化。植物组织的选择植物内生真菌分离的过程中,植物的自然环境、季节、地区、部位的不同都会影响到该植物内生真菌的数量和种类,为保证分离得到的是内生真菌而不是植物的病原菌或表面的附生菌,一定要选取健康植物;为避免内生真菌受宿主植物的影响,要在釆集后的一周之内将植物的内生真菌分离。
表1紫薯内真菌形态的特征
3 植物组织的表面处理
表面消毒的时间、试剂浓度等因素对内生真菌的分离都会产生一定的影响。消毒的时间短、试剂的浓度低不仅不能完全分离出内生真菌,且分离得到的菌株也并非是内生真菌,很有可能是表面的附生菌,同时还会抑制内生真菌的生长;灭菌时间长、试剂的浓度高,虽然能够达到灭菌的目的,但是灭菌的力度过大,也会将分布于表皮下的内生真菌杀死。内生真菌鉴定结果对株产孢的紫薯内生真菌鉴定结果显示,其中赤霉属株、链格孢属株、聚孢霉属株;麻黄株产孢菌中,链格抱属株、青霉属株、聚抱霉属株、头抱霉属株、单梗头抱霉属株、鞭孢霉属株。对不产孢的菌株将在以后的研究中,通过各种诱导方法使其产孢,并再进行鉴定。