上海博讯医疗生物仪器股份有限公司调查发现近年来,已经成为生物制药有效途径之一的是将生物活性成分从天然产物中提取出来。挑选天然药物最主要的原料一直以植物为主,但用于药用 的植物中活性物质在其组织中含量一般很低,如果 为了自身利益,人们一直过度使用野生药用植物资 源,该物种就会濒危直至灭绝,这样就会使环境遭到破坏,还会破坏生物多样性。为了解决环境资源问题,近年来,研究了野生药用植物的热点,重点是药用植物的内生真菌。研究表明,内生真菌的祖先可能是植物 病原体,长期存在于植物组织中,与寄主植物“共同进化”,因此在此过程中,形成的代谢物可能与宿主植物相同或相似。许多物质都有多种活性。内生真菌,从不同植物中分离纯化出来,其种类数目不同,少的有几种到十几种,多的有几百种。上海博讯生物仪器股份有限公司通过对蒲公英内生真菌的培养、纯化和鉴定,为将药用微生物资源更好地开发奠定坚实基础。
1仪器
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2 制作培养基
称取土豆200g,经清洁、去皮后切成块,用蒸馏水煮沸,纱布折叠成8层,然后过滤,加入20g葡萄糖,并加入20g琼脂。化妆用1L量筒至1000mL和分配到3个锥形瓶中,然后用高压蒸汽锅灭菌。除菌后,将介质的温度降低至约55℃,并加入青霉素钠的80×104U和100×104U硫酸链霉素去除内生 细菌。倒30个平板,放置于超净台内,等待接种。
3 内生真菌的培养
选择没有害虫和伤口的新鲜蒲公英并用无菌水冲洗。上海博讯医疗生物仪器股份有限公司在超洁净平台上,采用组织切割法采集植物的茎、叶和根,用手术刀将蒲公英的茎和根切成0.5cm×0.5cm×0.5cm,0.5cm×0.5cm的小块。将切割的材料置于乙醇中2,4min,并比较消毒时间。将混合物用蒸馏水洗涤3次,然后将该材料置于浸有汞 的溶液中浸泡2min,用蒸馏水冲洗3次,并置于无菌滤纸上。吸去水后,将其分别置于含有硫酸链 霉素的培养基上,在各板上放置4片,密封膜,在30℃的培养箱中培养3~7d。 另在一个平板内倒入无菌水,与上述平板一起放 入培养箱中,观察是否有细菌长出,作为无菌参照。
4 结论
作为微生物资源的植物内生微生物,较普遍地存在于植物中。上海博讯拿其与通常的微生物相比,植物内生微生物对植物表现出一定的亲和力。植物又是内生微 生物赖以生存的物质基础,植物生产极大地关系到社会的繁荣和发展。因此,植物内生微生物研究、资源的积累及其操作技术和利用技术的研究有着重要意义。