筛选获得一株 产 β-半乳糖苷酶的克雷伯氏菌，该酶具有较好的 转糖苷活性。 首次对克雷伯氏菌来源的 β-半 乳糖苷酶基因进行重组表达， 成功得到具有优良 转糖苷活性的 β-半乳糖苷酶，并探究其酶法转化 乳糖合成 GOS 的工艺条件，为丰富 β-半乳糖苷酶 资源及低聚半乳糖制备提供理论依据。水平摇床，江苏其林贝尔仪器制造有限公司； 电热鼓风干燥箱、YXQ-75SII压力蒸汽灭菌器，上海九州网址实业 有限公司；生物安全柜，青岛海尔特种电器有限公 司；高速离心机，英国 BECKMAN COULTER；超声 波细胞破碎仪，南京南京先欧仪器制造有限公司； PCR 仪， 德国 Biometra 公司； 凝胶成像仪， 上海 Tanon 公司；Multitemp III 恒温循环水浴器、 琼脂 糖凝胶电泳仪， 美国 GE 公司；Agilent 1260 高效 液相色谱-示差折光检测器，美国 Agilent 公司。

    经重组 表达后的 β-半乳糖苷酶酶活力比野生菌株提高 约 10 倍，且转糖苷活性保持在较高水平。 酶法转 化乳糖过程中， 最优条件下可使 GOS 得率达到 44%， 与已报道的 β-半乳糖苷酶相比具有良好的 转糖苷作用。 该研究结果表明克雷伯氏菌 B5582Y 来源的 β-半乳糖苷酶及其重组酶在低聚半乳糖 合成中具有较大的应用潜力。