灵芝（Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ）是一种营养和药用价值极高且无毒副作用的药食同源真菌，具有扶正固 本、滋补强身的功效．灵芝的主要有效成分有氨基酸、多肽、蛋白质、生物碱、灵芝多糖、三萜类、多酚类、有机 锗、维生素等．灵芝具有保护肝脏、抗氧化、防衰老、提高机体免疫力、降血糖血脂、抗肿瘤等功效．

１ 材料与方法

１．１ 材料与试剂

灵芝菌种，北京吉园科技有限公司；牛蒡、土豆、茉 莉 花 茶 等 原 材 料，市 售；海 藻 酸 钠、β－环状 糊 精、香 草 醛、苯酚等，分析纯试剂．

１．２ 仪器与设备

ＳＷ－ＣＪ－２ＦＤ超净工作台，上海博讯实业有限公司医疗设配厂；ＨＨ．Ｂ１１．６００－Ｓ－Ⅱ恒温培养箱，上海跃进医疗机械厂；ＨＺ１５０Ｌ恒温培养摇床，ＩＸＱ－ＳＧ４６－２８０Ａ 立式压力蒸汽灭菌机，上海申安医疗机械厂．

１．３ 方法

１．３．１ 灵芝菌种活化、培养

马铃薯葡萄糖琼脂斜面培养基的配制：按国标 ＧＢ４７８９．１５—２０１０配制，用于菌种的复苏与保存 ． 制备液体培养基：取５０ｇ新鲜去皮牛蒡根，用组织捣碎机破碎，加入５ｇ酵母浸膏混匀，加水至５００ｍＬ， 于电炉上煮沸并且保持微腾６ｍｉｎ． 灵芝液体培养：灵芝菌株接种到马铃薯葡萄糖琼脂斜面培养基上进行活化，取活化后灵芝菌块接种于牛 蒡液体培养基中培养，用苯酚－硫酸法测胞外多糖含量．

１．３．２ 茉莉花茶汁的制备

将茉莉花茶放入一定 量 的 烧 杯 中，按 １∶５０ 的比例加入茉莉花茶和蒸馏水，于 ９０ ℃ 水浴 锅 中 浸 泡 １０ｍｉｎ，冷却、过滤得到绿茶汁．

１．３．３ 灵芝液体发酵培养单因素试验

分别改变培养温度、时间和转速，测定胞外多糖含量．培养温度分别为２１，２４，２７，３０，３３ ℃；培养时间分 别为５，６，７，８，９ｄ；转速分别为９０，１００，１１０，１２０，１３０ｒ／ｍｉｎ．

１．３．４ 保健饮料产品工艺流程

工艺流程：灵芝菌种活化培养→灵芝液体培养→发酵液过滤→离心→取上清液作为调配液→添加茉 莉花茶汁、柠檬酸、稳定剂等调配→均质→灌装→封口→灭菌→冷却→产品．

１．３．５ 保健茶饮料产品稳定性实验

选择羟甲基纤维素纳、黄原胶、β－环状糊精等稳定剂进行正交试验．因素水平见表１



１．３．６ 饮料产品调配优化试验

将发酵液离心分离后的上清液作为调配液，按比例加入柠檬酸、茉莉花茶汁、白砂糖等进行调配．因素水 平见表２．

１．３．７ 保健饮料产品质量检测

１）感官评价 选择１０名专业人员对保健茶饮料进行感官评分 ．评分标准见表３．
２）茶饮料产品理化指标测定方法 灵芝三萜化合物，采用可见分光光度法测定；灵芝多糖，用苯酚－硫酸 法测定；可溶性固形物，用折光法测定；砷，用 ＧＢ／Ｔ５００９．１１—２００３银盐法测定；铅，用 ＧＢ／Ｔ５００９．１２—２０１０ 石墨炉原子吸收光谱法测定．
３）茶饮料产品微生物指标测定方法 菌落总数，用 ＧＢ／Ｔ４７８９．２—２００３方法检测；大肠菌群，用 ＧＢ／Ｔ ４７８９．３—２００３方法检测．

２ 结果与分析

分析得到的最优方案是 Ａ１Ｂ１Ｃ２，即羟甲基纤维素钠为 ０．０９％，黄原胶为０．０５％，β－环状糊 精为０．２０％．从结果中比较得出，黄原胶是最能影响饮料的稳定性的，其次是β－环状糊精，对饮料的稳定性 影响最小的是羟甲基纤维素钠．如此重复３次，得出平均值为０．５２％．灵芝牛蒡茉莉花茶饮料最优调配方案为 Ａ３Ｂ１Ｃ１Ｄ２，即调配液２５％，茉莉花茶１５％，柠檬酸 ０．０７％，白砂糖糖７％．由极差分析得出各因素对保健茶饮料感官评价的影响：茉莉花茶＞白砂糖＞柠檬酸 ＞调配液．按最优方案调配的茶饮料经均质、灌装、封口、灭菌、冷却得产品，呈淡黄绿色，均匀一致，有灵芝和 茉莉花茶的香气和滋味，口感好．

３ 结论

１）通过单因素实验得出灵芝发酵培养最佳条件为温度２７ ℃、时间６ｄ、转速１１０ｒ／ｍｉｎ．
２）通过正交试验优化保健茶饮料产品稳定性条件为羟甲基纤维素钠０．０９％、黄原胶０．０５％、β－环状糊精０．２０％．
３）通过正交试验优化保健茶饮产品料调配条件为调配液２５％、茉莉花茶１５％、柠檬酸０．０７％、白砂糖 ７％，经均质、灌装、封口、灭菌得饮料产品． 灵芝牛蒡茉莉花茶饮料产品澄清透明，呈浅黄绿色，既有茉莉花茶香气和滋味，又有灵芝和牛蒡独特风 味，口味纯正，酸甜适宜，营养功效全面，卫生检验符合国家标准．

 

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