新生儿 ＡＢＯ 溶血病（ＡＢＯ－ＨＤＮ）是母体受到胎 儿红细胞抗原刺激而产生ＩｇＧ 类血型抗体，该抗体可 以通过胎盘屏障进入胎儿的体内，致敏胎儿的红细 胞，并被胎儿的单核巨噬系统处理，从而引起胎儿或 新生儿红细胞被破坏而导致免疫性溶血。在我国， 母婴 ＡＢＯ 血型系统不合占比较高。因此，孕妇产前 检查ＩｇＧ 血型抗体效价，并分析其与新生儿溶血病 （ＨＤＮ）的发病率关系，是早期预防及后期辅助诊断 ＡＢＯ－ＨＤＮ 的有效方法。本研究通过对入组的５６ 例 Ｏ 型 Ｒｈ（Ｄ）阳性孕妇进行产前ＩｇＧ 血型抗体效价 检测，对其分娩后的新生儿进行 ＡＢＯ－ＨＤＮ３项的检 测，探讨孕妇产前ＩｇＧ 血型抗体效价与 ＡＢＯ－ＨＤＮ 发 生率之间的关系，现将结果报道如下。

１ 资料与方法

１．１ 一般资料

随机选取本院妇产科门诊产检的５６ 例 Ｏ 型 Ｒｈ（Ｄ）阳性孕妇，年龄２２～３６岁，中位年龄 ３２岁；孕期２１～２５周，中位孕期２３周。纳入标准：本 院产科门诊产检，身体健康，孕 期 未 见 异 常 的 孕 妇。 排除标准：产前不规则抗体阳性、患有自身免疫性溶 血性疾病或其他原因导致的各种溶血性疾病、有输血 史等。孕妇均进行第一次产前 ＡＢＯ 血型抗体效价检 测，记录相关参数，包括孕妇 ＡＢＯ 血型、ＩｇＧ 血型抗 体效价、不规则抗体、血常规等。

１．２ 试剂

ＡＢＯ 反定型用红细胞及抗 Ａ、抗 Ｂ、抗 Ｄ 标准血清、不规则抗体检测试剂、２－巯基乙醇（２－Ｍｅ） 均为上海血液生物医药有限责任公司生产；ＡＢＯ 血 型卡、抗人球蛋白微柱凝胶检测卡均为长春博讯生物 技术有限责任公司生产。

１．３ 方法

１．３．１ 抗体效价检测

采集孕妇产前静脉血液标 本，进行血常规、ＡＢＯ 血型、不规则抗体及ＩｇＧ 血型 抗体效价检测。血常规检测采用 Ｓｙｓｍｅｘ－ＸＮ９０００全 自动血细胞分析仪检测；ＡＢＯ 血型鉴定采用２次复 核方式，第１次用微柱凝胶卡法作正反定型确定孕妇 血型，第２次使用抗 Ａ、抗 Ｂ、抗 Ｄ 标准血清及 ＡＢＯ 反定型用红细胞，采用试管法作正反定型复核孕妇血 型。不规则抗体试验：采用九州网址抗人球蛋白微柱凝胶 卡按试剂盒说明书操作。孕妇产前ＩｇＧ 血型抗体效 价试验：采用抗人球蛋白微柱凝胶卡法按照２－Ｍｅ试 剂说明书操作，具体分３个步骤进行试验，第１步将 孕妇血清与２－Ｍｅ按照１∶２、１∶４、１∶８、１∶１６、１∶３２、 １∶６４、１∶１２８、１∶２５６、１∶５１２、１∶１０２４的比例在标 记好的试管内稀释；第２步将稀释液放置３７ ℃恒温水 浴箱１５ｍｉｎ进行ＩｇＭ 抗体裂解操作（裂解后溶液需 用 ＡＢＯ 反定型用红细胞溶液验证裂解是否完全，若未完全裂解需用０．９％氯化钠溶液稀释下一个比例重 新裂解，裂解后重复第２个步骤）；第３步用裂解后溶 液与０．８％的 Ａ 型或Ｂ型反定型用红细胞溶液按照１ ∶１比例加入抗人球蛋白微柱凝胶卡中进行孕妇产前 抗体效价检测。

１．３．２ ＡＢＯ－ＨＤＮ３项检测

用微柱凝胶卡法对新 生儿血型及 ＡＢＯ－ＨＤＮ３项检测，其中包括间接抗人 球蛋白试验（ＩＡＴ）、直接抗人球蛋白试验（ＤＡＴ）、抗 体释放试验。ＩＡＴ 及 ＤＡＴ 两项试验按照抗人球蛋 白卡试剂说明书进行操作；抗体释放试验分 ３ 个步 骤：第１步用生理盐水洗涤压积红细胞３～５次（洗涤 末次吸出上清液，作抗体释放试验的阴性对照，以验 证洗涤是否充分）；第２步加入等体积的生理盐水充 分混匀后置５６ ℃水浴箱１０ｍｉｎ；第３步离心后取出 上清液（即放散液）加入抗人球卡并加入洗涤末次的 上清液作为阴性对照，进行抗体检测。

１．４ 结果判断

ＡＢＯ－ＨＤＮ 的诊断包括以下几点： 母婴血型不同、ＤＡＴ、ＩＡＴ 和抗体释放试验的结果。 以抗体释放试验阳性为诊断标准，结合新生儿血红蛋 白、胆 红 素 水 平 等 临 床 数 据 及 其 临 床 症 状 来 诊 断 ＡＢＯ－ＨＤＮ。见表１。

１．５ 统计学处理

采用 ＳＰＳＳ２０．０软件对数据进行 分析。计数资料采用百分数表示，组间比较采用χ ２ 检验。以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。

２ 结 果

结果显示，５６例 Ｏ 型 Ｒｈ（Ｄ）阳性孕妇产前抗体效价以低效价为主， ９０．７％的孕妇抗体效价在１∶２５６以下，其中，５０．０％ 的孕妇抗体效价≤１∶６４，抗体效价＜１∶６４的患者占 ２５．９％，抗体效价为１∶６４的患者占２４．１％。抗体效 价为１∶１２８的患者占１８．５％，抗体效价为１∶２５６的 患者 占 ２２．２％，抗 体 效 价 ≥１∶５１２ 仅 占 总 数 的 ９．３％。以孕妇产前ＩｇＧ 血型抗体效价１∶６４作为界值， 将入组的孕妇按照参考值分为两组。结果显示，产前 ＩｇＧ 血型抗体效价≥１∶６４组 ＡＢＯ－ＨＤＮ 阳性检出 率高于产前效价＜１∶６４组（Ｐ＝０．０２）。产前抗体效 价＜１∶６４、１∶６４、１∶１２８、１∶２５６、≥１∶５１２ 的 ＡＢＯ－ＨＤＮ 检 出 率 分 别 为５６．３％、６９．２％、９０．０％、 ９１．７％、１００．０％。对５６例新 生儿按 ＡＢＯ 血型进行分组，Ａ 型新生儿 ＡＢＯ－ＨＤＮ 阳性率为７２．７％，Ｂ型 ＡＢＯ－ＨＤＮ 阳性率为７９．４％， Ｂ型新生儿 ＡＢＯ－ＨＤＮ 阳性率高于 Ａ 型，但差异无统 计学意义（Ｐ＝０．５６）。进一步研究分析发现，在ＩｇＧ 血型抗体 ＜１∶６４ 和 １∶６４ 的孕妇中，Ｂ 型 新 生 儿 ＡＢＯ－ＨＤＮ 检出率高于 Ａ 型，但差异无统计学意义 （Ｐ＞０．０５）；在ＩｇＧ 血型抗体１∶１２８和１∶２５６孕妇 中，Ａ 型新生儿 ＡＢＯ－ＨＤＮ 检出率则高于 Ｂ 型，差异 有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。ＩｇＧ 血型抗体≥１∶５１２的 孕妇中，Ａ 型新生儿与Ｂ型新生儿 ＡＢＯ－ＨＤＮ 检出率 差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。

３ 讨 论 　　

上海九州网址通过动态监测孕妇产前ＩｇＧ 血型抗体效价水平对预 防 ＡＢＯ－ＨＤＮ 发生有着重要意义。胎儿红细胞抗 原免疫母体产生的ＩｇＧ 血型抗体能通过胎盘屏障与 胎儿的红细胞血型抗原相结合，分娩后，容易引起新生儿发生肝脾肿大、胆红素脑病甚至死亡等溶血病特 征，严重威胁新生儿的健康乃至生命安全。因此， 对孕妇进行产前ＩｇＧ 血型抗体效价检测，可以判断孕 妇血中是否存在ＩｇＧ 类血型抗体，从而有效地预防 ＡＢＯ－ＨＤＮ。 本次研究通过对入组的５６例 Ｏ 型 Ｒｈ（Ｄ）阳性的 孕妇进行产前ＩｇＧ 血型抗体效价检测，并对孕妇分娩 后的新生儿进行 ＤＡＴ、ＩＡＴ 及抗体释放试验的检测， 通过收集孕妇产前血型抗体效价结果及 ＡＢＯ－ＨＤＮ３ 项试验结果来判断 ＡＢＯ－ＨＤＮ 的发生情况，研究结果 显示，５０．０％的孕妇产前抗体效价≤１∶６４，这提示在 日常检测中应该注意预防漏检低效价的样本。由此 可见，设定孕妇产前抗体参考值，对预测 ＡＢＯ－ＨＤＮ 的价值意义重大。