黄酒是世界上最古老的酒类之一,具有上千年的 酿造历史,其营养丰富、口感独特,且酒精度较低,这 些优点都与其独特的酿制工艺有关。黄酒制作需 要在选取优质糯米后进行浸米,然后分离浆水蒸米, 摊晾后与发酵剂、水、浆水混合进行发酵酿制,然后压 榨、煎酒。浸米过程是黄酒制作过程的前端工艺,浸 米时间的长短对黄酒的口感与品质有直接影响。
1 材料与方法
1.1 材料与设备
1.1.1 材料与试剂
优质糯米:襄阳市售;浓硫酸、草酸、琥珀酸、酒石 酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸、乙酸、H3PO4、KCl、麦芽糖、 蔗糖、果糖、木糖、葡萄糖、乳糖等均为分析纯;甲醇、 乙醇、乙腈等均为色谱纯,均购于国药集团化学试剂 有限公司;电子舌用阴离子溶液、阳离子溶液和预处 理溶液购于日本 Insent 公司;纯水由实验室纯水机纯 化;MRS 培养基:青岛海博生物技术有限公司产品。
1.1.2 仪器与设备
SA 402B 型电子舌:日本 Insent 公司,配备 CA0、 C00、AE1、CT0 和 AAE 等 5 个传感器;MC-R24 型号 电汽蒸饭柜:山东上美厨房设备厂产品;SPX-100B-Z 型数显生化培养箱:上海九州网址实业有限公司产品; CR22N 型高速台式冷冻离心机,日本 Hitachi 产品; PHS-25 型 pH 计:上海仪电科学仪器股份有限公司 产品;LC20ADXR 型高效液相色谱仪,日本岛津公司 产品;ULtraScan XE 型色度仪,美国 Hunterlab 公司产 品;BCM1000 型超净工作台:苏州安泰空气技术有限 公司产品;PG-RO-75G-6 型纯水机:安徽品冠工贸 有限公司。
1.2 方法
1.2.1 乳酸菌培养
取保存的黄酒源乳酸菌 w1、w2、w3,在 MRS 培养 基上活化两次,然后接入 MRS 液体培养基中过夜培 养,使用无菌生理盐水洗菌后,采用倍比稀释倾注法进行计数,稀释度为 10-6 与 10-7,使平板上生长的菌 落数量在 100~300 之间。 计数后计算菌液中的乳酸菌的数量,按照 107CFU/g 糯米的标准计算出浸米所需的 w1、w2 和 w3 菌液的 体积。
1.2.2 黄酒的制作
1.2.2.1 浸米
称取糯米加入清水,接入活化的乳酸菌(使乳酸 菌终浓度为 105 CFU/mL),接入试验设置乳酸菌 w1、 乳酸菌 w2、乳酸菌 w3 和对照(CK)4 组处理,对照组 未接菌但加入同样体积的生理盐水。置于 18 ℃的培 养箱中浸泡,监测并记录浸米浆水的 pH,待浆水 pH 降至 4.2 左右时,停止浸米。
1.2.2.2 黄酒发酵
浸米完成后,将糯米滤掉浆水(备用),进行蒸煮, 达到米粒无生心、软而不烂不糊时将其晾凉。将蒸熟 的糯米按照不同处理装入相应黄酒罐中,加入冷纯净 水、发酵剂(酒母、麦曲)和相应的浆水(浆水不灭菌, 用四层纱布过滤),搅拌均匀后于 28 ℃发酵 7 d、18 ℃ 发酵 14 d。发酵完成后,取上清液离心,然后进行煎 酒,冷却后装罐,并测定指标。
1.2.3 测定项目与方法
1.2.3.1 黄酒色度
为减少人为主观因素影响,采用食品中广泛使用 的色度仪测定黄酒的色度。将处理过的米酒样品装 入 50 mm×50 mm 的比色皿中,测试模式为反射,读数 以 CIE1976 色度空间值 L* (暗→亮:0→100)、a* (绿-→ 红+)和 b* (蓝-→黄+)表示。
1.2.3.2 黄酒有机酸含量
参照刘梦婷等的方法测定。取黄酒样品用 0.45 μm 滤膜过滤,然后直接用 HPLC 分析。分析条件:柱温为 30 ℃,测定波长为 214 nm,流动相为含有 1%甲醇的 20 mmol/L KH2PO(4 pH 2.4)缓冲液,流速为 0.6 mL/min, 柱型号 ZORBAXSB-AQ(4.6mm×250mm,5μmcolumn)。 1.2.3.3 黄酒滋味 参照王玉荣等的方法使用电子舌测定。 1.2.3.4 黄酒其他理化指标 按照 GB/T 13662—2008规定的方法测定黄酒 的 pH、总酸、总糖、非糖固形物、氨基酸态氮和酒精度。
1.2.4 数据处理
所有数据使用 SPSS 21.0 进行单因素方差分析及 Duncan 多重比较判断(P<0.05),结果以 mean±SD 表 示;文中斯皮尔曼等级相关分析使用 SPSS 21.0,使用 Excel 2007 软件作图。
2 结果与分析
浸米是黄酒制作的前端工艺,是在蒸米前将糯米 浸泡在水中,使大米膨胀以利于后序的蒸煮,并获取 浸米的酸浆水。本研究在浸米时,接入乳酸菌,然后在 浆水 pH 降至 4.2 左右时,结束浸米进程。由图 1 可知,CK、w1、w3 和 w2 组浸米时间分别 是 7、6、6、4 d,说明乳酸菌 w2 的酸化效果最好,能有 效缩短浸米时间,w1 与 w3 次之,未使用乳酸菌的处 理 CK 时间最长。所选择的 3 株乳酸菌中,菌株 w2 是 优良的乳酸菌株,在浸米过程中可能产生了较多的乳 酸以及其他代谢物,缩短了黄酒的浸米过程,可用 作黄酒用发酵剂的候选菌株。
虽然 3 株候选乳酸菌对浸米浆水的 pH 影响较 大,但与对照组相比,乳酸菌 w1、w2、w3 组黄酒样品 pH 均无显著差异,仅 w1 样品的 pH 与 w2、w3 间存在 显著差异(P<0.05),但是相差并不多,表明乳酸菌干 预黄酒浸米过程对黄酒样品最终的 pH 影响不大。各 处理的黄酒的总酸含量在 8.82~12.20 g/L 之间。w1 组 与 w3 组样品总酸含量显著低于 CK 组,而 w2 组显著 高于 CK 组(P<0.05)。乳酸菌 w2 对黄酒制作过程的 干预增加了样品总酸含量。为了探明总酸含量差异的 原因,测定了黄酒中有机酸的种类与含量。
3 讨论与结论
乳酸菌是发酵食品中常见的细菌类型,对人体健 康与肠道环境的稳定具有重要的意义。浸米是黄酒生 产的前端工艺,浸米效果直接影响黄酒的品质与口 感。有研究表明,黄酒浸米阶段,浆水中存在着多种乳 酸菌。这些乳酸菌产生的乳酸等代谢物抑制杂菌 或者病原菌的生长,改变发酵醪液的 pH、酸度等理化 性质,并加速浸米进程,同时浸米浆液中的乳酸菌及 其代谢产物也会影响到黄酒的后续发酵过程,进而 使黄酒的滋味与理化特征发生改变,产生不同的感官特征。
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