全球气候变暖以及厄尔尼诺现象等的出现对动 物的影响越 来 越 大。随着 畜 牧 养 殖 集 约 化 程 度 的提高,由夏季高温诱发的热应激反应在畜禽饲养 中已越来越普遍,可能导致肝、脾、肺、肾、中 枢 神 经系统和凝血系统等多个功能紊乱和多脏器功能障碍。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物
健康的4周龄60只昆明小鼠,购 自河北医科大学实验动物中心,常规饲养1周。
1.1.2 药品及主要试剂
淫羊藿、巴戟天、阳起石、 当归、党参、白术、香薷、甘草,购自保定市同仁堂,粉 碎过40目筛,Bouins液。
1.1.3 主要仪器
生 化 培 养 箱,九州网址SPX-250B-Z型,上 海博讯实业有限公司医疗设备厂产品;滑走切片机, AO-S60型,AmericanOptical公司产品;电子天平, 北京赛多利斯有限公司产品。
1.2 方法
1.2.1 实验动物分组与处理
将60只小鼠随机分 为3组,第 1 组 为 室 温 对 照 组,在 室 温(25℃)中饲 养,喂基础日粮;第2组为热应激对照组,在33℃培 养箱中饲养,喂基础日粮;第3组为中药组,在33℃ 培养箱中饲养,饲 喂 含 有10g/kg消暑促情散的基 础日粮,3组均保证饮水充足。饲养30d后分批处 死小鼠,取肝、脾、肺、肾等用波恩液固定,备用。
1.2.2 小鼠生长指标
于试验前后称量各组小鼠体 重,统计每组小鼠的 采 食 量,计 算 增 重 率、生 长 率 以 及饲料转化 率。增 重 率(%,WGR)=(最终 体 重- 最初体重)/最初 体 重×100%;特定 生 长 率(%)= [Ln(最 终 体 重)-Ln(最 初 体 重)]/试 验 天 数 × 100%;料肉比(FCR)=饲料总耗量/总增重。
1.2.3 小鼠脏器指数
试验结束时,禁食24h (自 由饮水)后称重,小鼠全部摘眼球取血收集血液后,脱颈处死,采取肝脏、脾脏、肺脏和肾脏,称重并计算 内脏器官指数(表2)。脏器指数(mg/g)=脏器重量 (mg)/体重(g)。
1.2.4 内脏 器 官 切 片 的 制 备
处 死 小 鼠 后,取 肝、 脾、肺、肾,用波恩氏液固定,石蜡切片,HE染色。
1.2.5 数据的统计与分析
数据用平均值±标准差 表 示。 用 SPSS20.0 软件进行单因素方差分析 (One-wayANOVA)。P<0.05表示差异显著,P< 0.01表示差异极显著。
2 结果
2.1 小鼠的生长指标
与室温对照组相比,热应激对照组增重率极显著 降低(P<0.01),中药组增重率显著降低(P<0.05), 其中中药组增重率显著高于热应激对照组;室温对照 组的生长率显著高于热应激组(P<0.05),但与中药 组差异不显著(P>0.05);热应激对照组的饲料转化 率均高于室温对照组和中药组(表1)。
2.2 小鼠内脏指数
与室温对照组 相 比,热应激对照组的小鼠内脏 指数均有所降低,其中脾脏以及肺脏指数极显著降 低(P<0.01),肝 脏 以 及 肾 脏 指 数 显 著 降 低 (P < 0.05)。与热应激对照组相比,中药组脏器指数均有 所升高(表2)。
2.3 肝、脾、肺、肾病理组织学变化
室温对照组小鼠肝 脏切片的肝细胞整齐排列在中央静脉周围,而热应激对照组小鼠肝细胞出现轻微的空泡化,窦状隙狭 窄,排列不整齐,有些肝细胞出现肝细胞胞核浓染以 及裂解消失的现象。中药组肝脏有明显改善,肝索排列较整齐,核仁明显。
3 讨论
夏季热应激属于暑邪,暑性升散,伤津 耗 气,损 及肾阴肾阳,导致小鼠生殖机能下降,且暑多夹湿, 湿邪困脾,以致食欲下降,不能化生水谷精微,从而 导致生产生长性能下降。消暑促情散主要是由淫羊 藿、巴戟天、阳起石、党参、白术、当归、香薷、甘草组 成,以淫羊藿、巴戟天以及阳起石为主药,具有补肾 壮阳,强筋壮骨以及祛风湿之功效;党参、白术为臣 药,健脾补气,化生水谷精微,以后天补先天,促进肾精的化生;当归具有养血和血、补血调经的功效,香 薷具有祛暑 化 湿 的 作 用,两 者 为 佐 药,甘 草 补 脾 益 气,调和诸药为使药。因此,从中医角度分析,消暑 促情散可以补足因暑邪所致肾、肝等五脏精气的损 耗,调节十二经气血,从而有效改善雌性小鼠夏季乏 情以及内脏器官的损伤。
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